शास्त्रीय स्तंभ क्रोमैटोग्राफी

शास्त्रीय स्तंभ क्रोमैटोग्राफी, तरल-ठोस क्रोमैटोग्राफी के रूप में भी जाना जाता है, एक स्थिर चरण (आमतौर पर एक ठोस adsorbent) और एक मोबाइल चरण (विलायक) . के बीच वितरण में अंतर के आधार पर विलेय को अलग करने के लिए एक तकनीक है। निश्चित चरण और मोबाइल चरण . के बीच गुणांक

कॉलम क्रोमैटोग्राफी में, स्थिर चरण आमतौर पर झरझरा पार्टिकुलेट पदार्थ (जैसे कि सिलिका जेल, एल्यूमिना, सक्रिय कार्बन, आदि .) से बना होता है, जिसमें एक बड़ी विशिष्ट सतह क्षेत्र और सोखना केंद्र होता है, और सॉल्यूट अणुओं के साथ हाइड्रोजन बॉन्ड, वैन डेर वॉल्स बलों और अन्य इंटरैक्शन के परिणामस्वरूप होता है। स्थिर चरण, और इसके चयन को विलेय की ध्रुवीयता और adsorbent . के सोखना विशेषताओं के अनुसार निर्धारित किया जाना चाहिए

पृथक्करण प्रक्रिया में, मिश्रण समाधान को मोबाइल चरण के प्रवाह के साथ स्थिर चरण . युक्त कॉलम में पेश किया जाता है, घटक स्थिर चरण . के साथ अलग -अलग सोखने की क्षमता के कारण अलग -अलग गति से कॉलम को अलग -अलग गति से नीचे ले जाते हैं। आसानी से मोबाइल चरण द्वारा दूर किया जाता है, और चलती गति तेज है . इस तरह से, प्रत्येक घटक जुदाई को प्राप्त करने के लिए कॉलम पर कई रंग बैंड बनाता है .

► व्युत्पन्न उपचार का उद्देश्य
व्युत्पन्न का मुख्य उद्देश्य विश्लेषणों के भौतिक रासायनिक गुणों को बदलना है ताकि वे कॉलम क्रोमैटोग्राफी . द्वारा अलगाव और पता लगाने के लिए अधिक उपयुक्त हों, विशेष रूप से, व्युत्पन्न प्रसंस्करण निम्नलिखित लक्ष्यों को प्राप्त कर सकता है:

1) बेहतर पता लगाने का प्रदर्शन: कार्यात्मक समूहों को पेश करके जो पता लगाना आसान है, विश्लेषण डिटेक्टर पर एक मजबूत संकेत उत्पन्न करता है, पता लगाने की संवेदनशीलता और सटीकता में सुधार करता है .
2) आणविक संरचना या ध्रुवीयता बदलें: स्तंभ पर इसके पृथक्करण को बेहतर बनाने के लिए विश्लेषण की ध्रुवीयता को समायोजित करें और शिखर अनुगामी को कम करें और . को ओवरलैप करें
3) बढ़ी हुई अस्थिरता: कुछ गैर-वाष्पशील विश्लेषणों के लिए, व्युत्पत्ति उनकी अस्थिरता में सुधार कर सकती है, जिससे उन्हें गैस क्रोमैटोग्राफी में अलग और पता लगाना आसान हो जाता है .
4) स्थिर विश्लेषण: विश्लेषण में संवेदनशील कार्यात्मक समूहों को अलगाव और पता लगाने के दौरान गिरावट या परिवर्तन को रोकने के लिए व्युत्पन्न द्वारा संरक्षित किया जा सकता है .

► व्युत्पन्न उपचार का प्रकार
व्युत्पन्न को मुख्य रूप से दो प्रकारों में विभाजित किया गया है: पूर्व-स्तंभ व्युत्पन्न और पोस्ट-कॉलम व्युत्पन्न:

1) पूर्व-स्तंभ व्युत्पत्ति:
विश्लेषण कॉलम में प्रवेश करने से पहले, यह रासायनिक रूप से व्युत्पन्न के साथ प्रतिक्रिया करता है, जो व्युत्पन्न का उत्पादन करता है .
डेरिवेटिव को तब अलग किया जाता है और एक कॉलम . पर पता लगाया जाता है
Precolumn derivatization में मुक्त प्रतिक्रिया की स्थिति और आसान बहु-चरण प्रतिक्रिया के फायदे हैं, लेकिन यह अशुद्धियों का परिचय भी दे सकता है या नमूने खो सकता है .
2) पोस्ट कॉलम व्युत्पत्ति:
एनालिटिस को पहले क्रोमैटोग्राफिक कॉलम पर अलग किया जाता है और फिर रासायनिक रूप से डेरिवेटिव सेल में डेरिवेंट्स के साथ प्रतिक्रिया करते हैं .
परिणामी डेरिवेटिव को तब डिटेक्टर में डिटेक्टर में दर्ज किया जाता है .

कॉलम के बाद की व्युत्पत्ति में अच्छी प्रजनन क्षमता और कम प्रभावित करने वाले कारकों के फायदे हैं, लेकिन इसके लिए अतिरिक्त उपकरणों और उपकरणों की आवश्यकता है .
► व्युत्पन्न प्रसंस्करण के आवेदन उदाहरण
प्राकृतिक दवा रासायनिक घटकों के निष्कर्षण और पृथक्करण में, यह व्युत्पन्न प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी के साथ संयुक्त निम्नलिखित अनुप्रयोगों को प्राप्त कर सकता है:

1) बेहतर पता लगाने की संवेदनशीलता: उदाहरण के लिए, अमीनो एसिड विश्लेषण में, पूर्व-स्तंभ व्युत्पन्न के माध्यम से आसानी से पता लगाने योग्य कार्यात्मक समूहों (जैसे फ्लोरोफोरस) की शुरूआत डिटेक्टर पर अमीनो एसिड की संकेत शक्ति को बढ़ा सकती है, जिससे पता लगाने की संवेदनशीलता में सुधार हो सकता है .}
2) पृथक्करण प्रभाव में सुधार करें: समान ध्रुवीयता या समान संरचना वाले कुछ यौगिकों के लिए, ध्रुवीयता को व्युत्पन्न उपचार द्वारा समायोजित किया जा सकता है, ताकि क्रोमैटोग्राफिक कॉलम पर पृथक्करण प्रभाव को . में सुधार किया जा सके, उदाहरण के लिए, फ्लेवोनोइड्स के विश्लेषण में, अलग -अलग कार्यात्मक समूहों को अलग -अलग कार्यात्मक समूहों के माध्यम से पेश किया जा सकता है।
3) संवेदनशील कार्यात्मक समूहों की सुरक्षा: संवेदनशील कार्यात्मक समूहों (जैसे फेनोलिक हाइड्रॉक्सिल, अमीनो, आदि .) युक्त विश्लेषणों के लिए, व्युत्पन्न इन कार्यात्मक समूहों को अलगाव और पता लगाने के दौरान गिरावट या परिवर्तन से बचा सकता है . उदाहरण के लिए, कार्बोहाइड्रेट डिसिटेड, हाइड्रॉक्सिल कार्यात्मक समूह पृथक्करण .