एल्यूमीनियम ऑक्साइड स्तंभ क्रोमैटोग्राफी
2. क्रोमैटोग्राफिक कॉलम (रोटेशन प्रकार)
3. क्रोमैटोग्राफिक कॉलम (मैनुअल)
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विवरण
तकनीकी पैरामीटर
एल्यूमीनियम ऑक्साइड (AL₂O₃) स्तंभ क्रोमैटोग्राफीविश्लेषणात्मक और तैयारी रसायन विज्ञान में एक व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली पृथक्करण तकनीक है, एल्यूमिना के सोखना गुणों का लाभ उठाने के लिए उनकी ध्रुवीयता {. एल्यूमिना के आधार पर अलग -अलग गतिविधि ग्रेड में मौजूद है (e . g} { अकार्बनिक पदार्थ .
इस विधि में, एक कॉलम को एल्यूमिना के साथ पैक किया जाता है, और नमूना मिश्रण को शीर्ष . पर लोड किया जाता है, फिर एक मोबाइल चरण (eluent) को स्तंभ के माध्यम से पारित किया जाता है . यौगिकों को वैन डेर वॉल्स बलों, हाइड्रोजन बॉन्डिंग, या आयनिक इंटरैक्शन के माध्यम से एल्यूमिना सतह के साथ बातचीत करें, अधिक दृढ़ता से पालन करें और धीमी गति से चलें . यह अंतर सोखना पृथक्करण को सक्षम करता है .
प्रमुख लाभों में तटस्थ यौगिकों को अलग करने के लिए इसकी प्रभावशीलता शामिल है, जैसे कि स्टेरॉयड, टेरपेन, और अल्कलॉइड्स, और नॉनपोलर के साथ इसकी संगतता मध्यम ध्रुवीय सॉल्वैंट्स . के लिए, हालांकि, अम्लीय या बुनियादी कार्यात्मक समूहों के साथ एल्यूमिना की प्रतिक्रियाशीलता के कारण, इष्टतम संकल्प .
यह तकनीक शोधन, गुणात्मक विश्लेषण, और जटिल मिश्रणों के अंशांकन के लिए प्रयोगशालाओं में मूल्यवान बनी हुई है, रासायनिक पृथक्करणों में सादगी और दक्षता का संतुलन प्रदान करता है .
पैरामीटर



प्रचालन प्रक्रिया
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अल्युमीनियमoज़ाइडcओलमोनcह्रोमैटोग्राफीएक महत्वपूर्ण क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण तकनीक है, इसकी संचालन प्रक्रिया में कई प्रमुख चरण शामिल हैं, निम्नलिखित ऑपरेशन प्रक्रिया के लिए एक विस्तृत परिचय है:
तैयारी
साधन और अभिकर्मक तैयारी:
इंस्ट्रूमेंट्स: क्रोमैटोग्राफिक कॉलम (या कॉलम), लॉन्ग ड्रॉपर (या पिपेट), ग्लास फ़नल, बॉटल, मुर्गा, आदि .
अभिकर्मक: तटस्थ एल्यूमिना (या अन्य प्रकार के एल्यूमिना, पृथक्करण आवश्यकताओं के अनुसार चुने गए), विकास एजेंट (जैसे कि इथेनॉल, मेथनॉल, एथिल एसीटेट, आदि ., अलग होने के लिए पदार्थ की ध्रुवीयता के अनुसार चुने गए), अलग होने के लिए नमूना, क्वार्ट्ज रेत, {1} {1} {1}
उपकरण और उपकरण:
स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए एक उपयुक्त समर्थन के लिए क्रोमैटोग्राफिक कॉलम को सुरक्षित करें .
मोबाइल चरण . के प्रवाह को नियंत्रित करने के लिए क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के निचले छोर पर एक मुर्गा स्थापित किया गया है
लोड हो रहा स्तंभ संचालन
भरना adsorbent:
समान कण आकार और कोई अशुद्धियों को सुनिश्चित करने के लिए adsorbent के रूप में उपयुक्त एल्यूमिना का चयन करें .
सूखी या गीली पैकिंग विधि के साथ भरें . जब सूखी लोडिंग, एल्यूमिना को सीधे क्रोमैटोग्राफिक कॉलम में जोड़ा जाता है, और कॉलम बॉडी को जोड़ते समय मारा जाता है, ताकि adsorbent को फिर से भर दिया जाता है और जब गीला लोडिंग, तो बमदों के लिए एक उपयुक्त मात्रा में एक गैप नहीं होता है। भरना .
समायोजन सिलेंडर:
सिलेंडर को फ्लैट और स्थिर रखने के लिए adsorbent के ऊपरी भाग में थोड़ा सा क्वार्ट्ज रेत जोड़ा जाता है।
सुनिश्चित करें कि adsorbent की मात्रा पर्याप्त है, आमतौर पर 30 से 40 गुना मिश्रण की मात्रा को अलग किया जाना है, और पर्याप्त सोखना और पृथक्करण प्रभाव सुनिश्चित करने के लिए 100 बार तक पहुंच सकता है .
धुलाई स्तंभ संचालन
विकासशील एजेंट का चयन करें:
अलग होने के लिए पदार्थ की ध्रुवीयता और घुलनशीलता के अनुसार, उपयुक्त विकास एजेंट को . का चयन किया जाता है
कॉलम धोना:
कॉलम के ऊपर से चयनित विकास एजेंट जोड़ें, और उचित रूप से कॉलम के निचले छोर पर मुर्गा को जारी करें ताकि विकास एजेंट धीरे -धीरे . बह जाए
अतिरिक्त प्रक्रिया के दौरान, यह पहले तेज होना चाहिए और फिर धीमा होना चाहिए, ताकि adsorbent हमेशा प्रसार एजेंट . द्वारा कवर किया गया हो
इसी समय, हवा के बुलबुले को हटाने के लिए कॉलम बॉडी पर टैप करें और अधिक घनी भरने . सुनिश्चित करें
लोडिंग और क्षालन संचालन
भंग नमूना:
यह सुनिश्चित करने के लिए कि नमूना पूरी तरह से भंग हो गया है और एकाग्रता मध्यम . है
नमूना जोड़ें:
भंग नमूना को ध्यान से क्रोमैटोग्राफिक कॉलम में जोड़ा जाता है ताकि पृथक्करण प्रभाव . पर adsorbent को थोपने से बचें
क्षालन:
जब मिश्रण समाधान का तरल स्तर adsorbent पर क्वार्ट्ज रेत के करीब होता है, तो eluting एजेंट . जोड़ा जाता है
ड्रॉप त्वरण को एक उपयुक्त सीमा (जैसे कि 1 से 2 बूंद प्रति सेकंड) के भीतर नियंत्रित किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि विकासशील एजेंट हमेशा Adsorbent . को कवर करने में सक्षम है
क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के परिवर्तन और विकासशील एजेंट के प्रवाह का निरीक्षण करें, समय में ऑपरेटिंग मापदंडों को समायोजित करें .
संग्रह और विश्लेषण
इकट्ठा करें:
अलग -अलग समय अवधि के प्रवाह को क्रमशः एकत्र किया जाता है, और प्रारंभिक निर्णय आमतौर पर रंग और पारदर्शिता की विशेषताओं के अनुसार किया जाता है .
विश्लेषण और प्रसंस्करण:
एकत्र किए गए अपशिष्टों का आगे विश्लेषण और इलाज किया जाता है, जैसे कि एकाग्रता, सुखाने, शुद्धता परीक्षण, आदि .
विश्लेषण के परिणामों के अनुसार, पृथक्करण प्रभाव और शुद्धता निर्धारित की गई थी .
सावधानियां
पूरे ऑपरेशन के दौरान, बाहरी हस्तक्षेप से बचने के लिए प्रयोगात्मक वातावरण को साफ और शांत रखा जाना चाहिए .
01
प्रयोगशाला सुरक्षा नियमों का पालन करें और उपयुक्त व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण पहनें .
02
अलगाव के प्रभाव की स्थिरता और सटीकता सुनिश्चित करने के लिए ऑपरेटिंग तापमान और आर्द्रता जैसी नियंत्रित स्थितियों पर ध्यान दें .
03
लोडिंग और क्षालन प्रक्रिया में, हमें क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के परिवर्तनों और विकास एजेंट के प्रवाह पर पूरा ध्यान देना चाहिए, समय में समस्या का पता लगाएं और इसे हल करने के लिए उपाय करें .
04
सारांश में, एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी की संचालन प्रक्रिया में कई प्रमुख चरण और सावधानियां शामिल हैं . इन चरणों के उचित चयन और संचालन के माध्यम से, कुशल और सटीक यौगिक पृथक्करण और शुद्धि को प्राप्त किया जा सकता है .}
बायोएनालिसिस के क्षेत्र में आवेदन
एक क्लासिक क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण तकनीक के रूप में,एल्यूमीनियम ऑक्साइड स्तंभ क्रोमैटोग्राफीविज्ञान और प्रौद्योगिकी की निरंतर प्रगति के साथ इसके जन्म के बाद से बायोएनालिसिस के क्षेत्र में व्यापक अनुप्रयोग क्षमता और अद्वितीय लाभ दिखाए गए हैं
मूल सिद्धांत
एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी एक पृथक्करण तकनीक है जो तरल-ठोस सोखना के सिद्धांत पर आधारित है . यह एक स्थिर चरण के रूप में एल्यूमिना का उपयोग करता है, विलायक के प्रवाह के माध्यम से (I . e}} मोबाइल के बीच, {4 {3} {3} {3} {3} के बीच अलग-अलग घटक { एल्यूमिना की सतह पर हाइड्रॉक्सिल समूहों और यौगिकों को अलग करने के लिए, जैसे कि वैन डेर वाल्स बल, द्विध्रुवीय बल, हाइड्रोजन बॉन्डिंग, आदि ., और इन इंटरैक्शन बलों में अंतर एल्यूमिना पर विभिन्न यौगिकों की अलग -अलग सोखना क्षमता को जन्म देता है, इसलिए अलगाव प्राप्त करने के लिए .
एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी का पृथक्करण प्रभाव कई कारकों से प्रभावित होता है, जिसमें एल्यूमिना के प्रकार (जैसे कि तटस्थ एल्यूमिना, बुनियादी एल्यूमिना, अम्लीय एल्यूमिना, आदि .), कण आकार, विशिष्ट सतह क्षेत्र, छिद्र आकार वितरण, मोबाइल चरण चयन और अलगाव की स्थिति . इन कारकों को अनुकूलित करने के लिए, इन कारकों को अलगाव के रूप में शामिल करें। प्राप्त किया .}




अमीनो एसिड विश्लेषण
अमीनो एसिड प्रोटीन की बुनियादी इकाइयाँ हैं और जीवित जीवों में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं . एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी कुशलता से अलग-अलग हो सकती हैं और विभिन्न प्रकार के अमीनो एसिड की पहचान कर सकती हैं . उपयुक्त एल्यूमिना प्रकार का चयन करके, वैज्ञानिकों ने एमिनो एसिड के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन से अलग किया जा सकता है।
पेप्टाइड्स और प्रोटीन का पृथक्करण और शुद्धि
एक पेप्टाइड एक यौगिक है जो पेप्टाइड बॉन्ड से जुड़े कई अमीनो एसिड से बना है, जबकि एक प्रोटीन एक जटिल जैविक मैक्रोमोलेक्यूल है जो मल्टीपल पेप्टाइड चेन को मोड़कर गठित होता है . एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी में पेप्टाइड्स और प्रोटीन के अलगाव और शुद्धि में एक अनूठा लाभ होता है। अलग -अलग आकारों और ध्रुवों को प्राप्त किया जा सकता है . इसके अलावा, एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी का उपयोग अन्य पृथक्करण प्रौद्योगिकियों (जैसे कि जेल निस्पंदन, आयन एक्सचेंज, आदि.) के साथ संयोजन में भी किया जा सकता है।
अल्कलॉइड का पृथक्करण
अल्कलॉइड्स जैविक गतिविधि के साथ नाइट्रोजन युक्त कार्बनिक यौगिकों का एक वर्ग है और व्यापक रूप से पौधों में मौजूद है . एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी में अल्कलॉइड्स के पृथक्करण में महत्वपूर्ण अनुप्रयोग मूल्य है . विकास .
न्यूक्लिक एसिड का अलगाव और शुद्धि
न्यूक्लिक एसिड जीवित जीवों में महत्वपूर्ण आनुवंशिक सामग्री हैं, जिनमें डीएनए और आरएनए . एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी शामिल हैं, का उपयोग न्यूक्लिक एसिड के पृथक्करण और शुद्धि के लिए भी किया जा सकता है . उपयुक्त एल्यूमिना प्रकार और एल्यूशन की स्थिति का चयन करके आणविक जीव विज्ञान अनुसंधान .
दवा चयापचयों का विश्लेषण
दवा के विकास के दौरान, एक दवा के मेटाबोलाइट्स को समझना एक दवा की प्रभावकारिता और सुरक्षा का मूल्यांकन करने के लिए महत्वपूर्ण है . एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी का उपयोग ड्रग मेटाबोलाइट्स के विश्लेषण के लिए किया जा सकता है . को अलग -थलग कर दिया और विवाट में दवाओं के चयापचय को अलग -थलग कर सकते हैं। ड्रग्स .
फायदे
कुशल पृथक्करण क्षमता
एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी में उच्च दक्षता होती है और बायोमोलेक्यूलस . के उच्च रिज़ॉल्यूशन पृथक्करण को प्राप्त कर सकते हैं
अच्छा रासायनिक स्थिरता
एल्यूमिना में अच्छी रासायनिक स्थिरता है और यह अलग -अलग प्रतिक्रिया वातावरण में काम कर सकता है . यह एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी को विभिन्न प्रकार के जटिल जैविक नमूना विश्लेषण के लिए उपयुक्त बनाता है, जिसमें अम्लीय, क्षारीय, उच्च तापमान और अन्य स्थितियां शामिल हैं .
अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखला
एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी न केवल अमीनो एसिड, पेप्टाइड्स और प्रोटीन के पृथक्करण और शुद्धि के लिए उपयुक्त है, बल्कि विभिन्न बायोमोलेक्यूल्स जैसे कि अल्कलॉइड्स, न्यूक्लिक एसिड और ड्रग मेटाबोलाइट्स . के विश्लेषण के लिए भी उपयुक्त है।
संचालित और पुन: उत्पन्न करना आसान है
एल्यूमिना कॉलम क्रोमैटोग्राफी का संचालन अपेक्षाकृत सरल है और इसके लिए जटिल उपकरण और बोझिल संचालन चरणों की आवश्यकता नहीं होती है . इसके अलावा, एल्यूमिना कॉलम को अगले उपयोग के लिए उपयुक्त उपचार विधियों द्वारा पुनर्जीवित किया जा सकता है . यह प्रयोगात्मक लागत को कम करता है और प्रयोगात्मक दक्षता में सुधार करता है . {
एल्यूमीनियम ऑक्साइड स्तंभ क्रोमैटोग्राफीबायोएनालिसिस में एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में उभरा है, बायोमोलेक्यूलस को अलग करने और शुद्ध करने के लिए अद्वितीय लाभ प्रदान करता है . इसके विकास की संभावनाएं विशेष रूप से विभिन्न जैविक प्रणालियों के लिए इसकी अनुकूलनशीलता के कारण वादा कर रही हैं . सिलिका जेल के विपरीत प्रोटीन, न्यूक्लियोटाइड्स, और अल्कलॉइड्स .
बायोफार्मास्यूटिकल्स में, एल्यूमीनियम ऑक्साइड कॉलम का उपयोग पुनरावृत्ति प्रोटीन और एंटीबॉडी . को परिष्कृत करने के लिए तेजी से उपयोग किया जाता है। इसके अतिरिक्त, नैनोटेक्नोलॉजी में प्रगति से कण आकारों को कम करके और सतह की एकरूपता में सुधार करके स्तंभ दक्षता बढ़ाने की उम्मीद है, जिससे पृथक्करण गति में तेजी लाई जा सकती है और संकल्प . बढ़ाना
पर्यावरण और खाद्य सुरक्षा परीक्षण में एल्यूमीनियम ऑक्साइड क्रोमैटोग्राफी की मांग भी {. बढ़ रही है, जो कि कीटनाशकों या भारी धातुओं के रूप में ट्रेस संदूषकों का पता लगाने की क्षमता है, वैश्विक नियामक रुझानों के साथ संरेखित करता है, जो कि कड़े गुणवत्ता नियंत्रण को प्राथमिकता देता है {{1} जटिल जैविक मैट्रिसेस से बायोमार्कर या चिकित्सीय एजेंट . स्तंभ डिजाइन और सामग्री में निरंतर नवाचार की संभावना है कि आधुनिक जैव -संबंधी वर्कफ़्लोज़ . में एक आधारशिला तकनीक के रूप में अपनी स्थिति को मजबूत किया जाएगा।
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