फंगसी शंक्वाकार फ्लास्क

प्रायोगिक सामग्री

 फंगल शंक्वाकार बोतल: कवक के संस्कृति और प्रतिरोध परीक्षण के लिए उपयोग किया जाता है, इसकी आकार और भौतिक बाँझपन बनाए रखने और संदूषण को रोकने में मदद करते हैं।

 एंटिफंगल ड्रग्स: कवक प्रतिरोध का आकलन करने के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली एंटिफंगल ड्रग्स, जैसे कि फ्लुकोनाज़ोल, इट्राकोनाज़ोल, वोरिकोनाज़ोल, आदि शामिल हैं।

 मध्यम: जैसे कि आरपीएमआई 1640 मध्यम, कवक के विकास और प्रजनन के लिए।

 फंगल उपभेद: प्रयोग के लिए आवश्यक कवक उपभेदों, जैसे कि कैंडिडा अल्बिकंस, कैंडिडा ट्रॉपिकलिस, आदि, को अग्रिम में शुद्ध और पहचाना जाना चाहिए।

 एसेप्टिक ऑपरेशन टूल्स: जैसे कि इनोक्यूलेशन रिंग, स्ट्रॉ, पिपेट, आदि, संदूषण को रोकने के लिए सड़न रोकनेवाला संचालन के लिए।

 निरंतर तापमान इनक्यूबेटर: कवक की खेती के लिए, एक उपयुक्त तापमान और आर्द्रता वातावरण प्रदान करना।

प्रयोगात्मक विधियों

 माध्यम तैयार करें: माध्यम के सूत्र के अनुसार, प्रत्येक घटक को सटीक रूप से तौलना, आसुत जल की उचित मात्रा जोड़ें, पीएच मान को उचित सीमा तक भंग करने और समायोजित करने के लिए गर्मी। संस्कृति माध्यम को कवक शंक्वाकार बोतलों में विभाजित किया गया था, और फिर एक आटोक्लेव में निष्फल कर दिया गया था। नसबंदी के बाद, मध्यम को एक उपयुक्त तापमान पर ठंडा करें और एक तरफ सेट करें।

 कवक का इनोक्यूलेशन: बाँझ ऑपरेटिंग टेबल पर, छोटी संख्या में कालोनियों की एक छोटी संख्या को बाँझ इनोक्यूलेशन रिंग का उपयोग करके फंगल उपभेदों से चुना जाता है और निष्फल माध्यम में टीका लगाया जाता है। संदूषण से बचने के लिए टीकाकरण के दौरान सड़न रोकनेवाला संचालन पर ध्यान दिया जाना चाहिए।

 ड्रग फॉर्मुलेशन और कमजोर पड़ने: वांछित एंटिफंगल दवा को सटीक रूप से तौलना, इसे उपयुक्त विलायक (जैसे डीएमएसओ) के साथ भंग करना, और इसे वांछित एकाग्रता में पतला करना। बाँझ परीक्षण ट्यूबों में दवा समाधान को दूर करें और एक तरफ सेट करें।

 ड्रग जोड़ और संस्कृति: इनोकेटेड कवक के संस्कृति माध्यम को अलग -अलग एंटिफंगल ड्रग समाधान के विभिन्न सांद्रता के साथ जोड़ा जाता है, ताकि प्रत्येक शंक्वाकार बोतल में दवा की एकाग्रता अलग हो। फिर, शंक्वाकार बोतल को एक निरंतर तापमान इनक्यूबेटर में रखा जाता है, जो उचित तापमान और आर्द्रता पर सेट होता है, और सुसंस्कृत होता है। संस्कृति अवधि के दौरान, कवक की वृद्धि को नियमित रूप से देखा जाना चाहिए और डेटा दर्ज किया जाना चाहिए।

 परिणाम अवलोकन और विश्लेषण: संस्कृति के बाद, कवक के विकास का निरीक्षण करने के लिए शंक्वाकार बोतल को निकाला गया। एक माइक्रोस्कोप के माध्यम से आकृति विज्ञान और कवक की संख्या देखी गई और डेटा दर्ज किया गया। इसी समय, माध्यम में कवक के बायोमास या मेटाबोलाइट सामग्री जैसे संकेतक कवक के दवा प्रतिरोध का मूल्यांकन करने के लिए निर्धारित किए जा सकते हैं। फंगल विकास पर दवाओं के विभिन्न सांद्रता के प्रभावों की तुलना करने और दवा प्रतिरोध का निष्कर्ष निकालने के लिए डेटा का सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया था।

प्रायोगिक परिणाम और विश्लेषण

प्रयोग के दौरान, यह माइक्रोस्कोप अवलोकन के माध्यम से पाया गया कि एंटिफंगल दवाओं की एकाग्रता में वृद्धि के साथ, कवक की वृद्धि दर और कॉलोनियों की संख्या धीरे -धीरे कम हो गई। जब दवा की एकाग्रता एक निश्चित स्तर तक पहुंच जाती है, तो कवक की वृद्धि पूरी तरह से दबा दी जाती है, और कॉलोनी को भी नहीं देखा जा सकता है। इससे पता चलता है कि कवक तनाव में दवा का परीक्षण किया जा रहा है।

आगे के विश्लेषण से पता चला कि अलग -अलग एंटिफंगल दवाओं के लिए अलग -अलग फंगल उपभेदों का प्रतिरोध अलग था। उदाहरण के लिए, कुछ उपभेद फ्लुकोनाज़ोल के लिए अधिक प्रतिरोधी हैं और इट्राकोनाज़ोल के लिए कम प्रतिरोधी हैं। यह तनाव की आनुवंशिक पृष्ठभूमि, विकास के वातावरण और दवा की कार्रवाई के तंत्र से संबंधित हो सकता है।

बहस

प्रयोगात्मक स्थितियों का नियंत्रण: प्रयोग में, प्रयोगात्मक परिणामों पर प्रदूषण के प्रभाव से बचने के लिए सड़न रोकनेवाला संचालन की स्थिति को सख्ती से नियंत्रित किया जाना चाहिए। इसी समय, कवक के सामान्य विकास और प्रजनन को सुनिश्चित करने के लिए, तापमान, आर्द्रता, आदि जैसे संस्कृति की स्थितियों के नियंत्रण पर ध्यान देना भी आवश्यक है।

दवा एकाग्रता की पसंद: दवा एकाग्रता की पसंद प्रयोगात्मक परिणामों पर एक महत्वपूर्ण प्रभाव है। बहुत अधिक एक एकाग्रता का कारण कवक बढ़ने में विफल हो सकता है, जिससे इसके प्रतिरोध का सही आकलन करना असंभव हो जाता है; यदि एकाग्रता बहुत कम है, तो यह कवक के विकास को बाधित नहीं कर सकता है, जिसके परिणामस्वरूप गलत प्रयोगात्मक परिणाम हैं। इसलिए, उचित दवा एकाग्रता सीमा को निर्धारित करने के लिए प्रयोग से पहले एक प्रारंभिक प्रयोग करना आवश्यक है।

दवा प्रतिरोध तंत्र की खोज: फंगल प्रतिरोध की पीढ़ी विभिन्न प्रकार के तंत्रों से संबंधित हो सकती है, जैसे कि ड्रग एफ्लक्स पंप, दवा लक्ष्य उत्परिवर्तन आदि।

निष्कर्ष

यह फंगल शंक्वाकार बोतल का उपयोग करके कवक प्रतिरोध प्रयोग करने के लिए एक प्रभावी तरीका है। अलग -अलग एंटिफंगल एजेंटों को कवक की संवेदनशीलता को प्रयोगात्मक स्थितियों को नियंत्रित करके, उचित दवा सांद्रता का चयन करके और फंगल विकास का अवलोकन करके सटीक रूप से मूल्यांकन किया जा सकता है। परिणामों से पता चला कि विभिन्न एंटिफंगल दवाओं के लिए अलग -अलग कवक उपभेदों का प्रतिरोध अलग था, जो उपभेदों की आनुवंशिक पृष्ठभूमि, विकास के माहौल और दवाओं की कार्रवाई के तंत्र से संबंधित हो सकता है। इसलिए, नैदानिक ​​उपचार और दवा विकास में, विशिष्ट परिस्थितियों के अनुसार उचित एंटिफंगल दवाओं और उपचार कार्यक्रमों का चयन किया जाना चाहिए।

आउटलुक

चिकित्सा अनुसंधान के गहनता और प्रौद्योगिकी के निरंतर विकास के साथ, फंगल प्रतिरोध प्रयोग के तरीकों और तकनीकों में लगातार सुधार किया जाएगा। भविष्य में, उच्च-थ्रूपुट अनुक्रमण और जीन चिप जैसी उन्नत प्रौद्योगिकियों का उपयोग कवक प्रतिरोध के तंत्र का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, जो नैदानिक ​​उपचार और दवा विकास के लिए अधिक सटीक और विश्वसनीय सैद्धांतिक आधार प्रदान करता है। इसी समय, कवक प्रतिरोध की बढ़ती समस्या को संबोधित करने के लिए नई एंटिफंगल ड्रग्स और उपचार रणनीतियों को भी विकसित किया जा सकता है।